・１０００・・论著・输血前不规则抗体筛查结果分析邹文涛何子毅李俊杰刘仁强刘景春【摘要】目的输血前对患者血清（浆）进行不规则抗体筛选和鉴定，分析不规则抗体的分布特不规则抗体征，预防溶血性输血反应的发生。方法用微柱凝胶法对２００６年６月到２００７年１２月问临床送检的疑难配血标本进行不规则抗体筛选和鉴定，分析不规则抗体的类型和分布特征。结果筛选鉴定阳性５４例，其中同种抗体２６（５１．８５％）例，自身抗体２６（４８．１５％）例，抗体特异性未确定２例，同种抗体中以Ｒｈ系统最多，占１５／２８（５３．５７％），其次为ＭＮＳｓ系统，占５／２６（１９．２３％），Ｒｈ系统抗一Ｅ明显多于抗一Ｄ，与以往文献报道不同；ＭＮＳｓ系统主要是抗一Ｍ；自身抗体主要为抗ＩｇＧ型抗体占１４／２６（５３．８４％），其次为抗ＩｇＧ和抗Ｃ３ｄ抗体同时阳性占８／２６（３０．７７％），冷自身抗体最少占４／２６（１５．３８％）；对有同种抗体的患者输入相应抗原阴性的红细胞后，患者未发生溶血性输血反应；有自身抗体的患者按自身溶血性贫血的输血原则进行输血后患者贫血症状缓解。结论输血前进行不规则抗体筛查，选择合适的血液输注能有效地降低或避免溶血性输血反应的发生，保证临床输血的安全性。【关键词】血清；抗体；溶血；输血中图分类号：Ｒ４４６．６１；Ｒ４５７．１文献标识码：Ａ文章编号：１６７３—４１３０（２００８）１１—１０００＿０３ＡｎａＩｙｓｉｓｏｆ靶ｒ∞ｎｉｎｇ啷ｕＩｔｓｏｆｉ唧ｌ盯ａｎｔｉｂｏｄｉ荡ｂｅｆｏ陀ｂＩ伽ｄｔｍｎｓｆｕｓｉｏｎＺｏ【，Ｗ叠行一缸Ｄ１，ＨＥＺｉ—ｙｉｌ，ＬＪ－，“行一Ｊ妇２，Ｐｆ口Ｚ．１．Ｄｏ挖ｇｇｚｍ竹ＣＰ行￡，诅ＺＢＺＤＤｄＳｆ口￡ｉＤ挖，Ｄｏ疗ｇｇＭ口咒５２３９３０，（、＾ｉ行口；２．Ｚ＾Ｄ“五Ｄ“Ｃ已挖ｆｒｎＺＢＺｏｏｄ万方数据【Ａｂｓｔｍｃｔ】Ｓ衄ｆｉＤ行。Ｚ＾（，“是ｏ“４６６０００，（、＾ｉ加ｏｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｄｅｎｔｉｆｙｓｅｒｕｍｏｒｐｌａｓｍａｉｒｒｅｇｕｌａｒａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓ，ａｎａｌｙｚｅｔｈｅｉｒａｓｄｉｓｔ“ｂｕｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ，ｓｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｗａｓａｐｐｌｉｅｄｈｉｎｇｂｌｏｏｄｓａｍｐＩｅｓｆｒｏｍｔｏｔｏｐｒｅｖｅｎｔｈｅｍｏｌｙｔｉｃｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｒｅａｃｔｉｏｎ．ＭｅｔｈｏｄｓＭｉｃｒｏｃｏｌｕｍｎｇｅｌｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇｉｒｒｅｇｕｌａｒａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｓｕｓｐｉｃｉｏｕｓｍａｔｃ—ｔｏＪｕｎｅ２００６ＣＩｅｃｅｍｂｅｒ２００７，ａｎｄｔｈｅｎｔｈｅ５４ｃａｓｅｓｔｙｐｅｓａｎｄｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓ—ｔｉｃｏｆｉｒｒｅｇｕｌａｒａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒ器ｕＩｔｓ２８ｗｅｒｅｉｒｒｅｇｕｌａｒａｎｔｉｂｏｄｙｐｏｓｉｔｉｖｅ，ｉｎｗｈｉｃｈｃａｓｅｓ（５１．８５％）ｗｅｒｅｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ。２６ｃａｓｅｓ（４８．１５％）ｗｅｒｅａｕｔｏｌｏｇｏｕｓａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，２ｗｅｒｅｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｉｎｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｒｈｓｙｓｔｅｍａｎｔｉｂｏｄｙｗａｓｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔｃａｓｅｓ（５３．５７％）（ｉｎｗｈｉｃｈａｎｔｉ—Ｅｗａｓｍｏｒｅｔｈａｎａｎｔｉ—Ｄ），ｆｏＵｏｗｅｄｂｙＭＮＳｓｓｙｓｔｅｍａｎｔｉｂｏｄｙ（１９．２３％）．Ａｎｔｉ—Ｍ（５，９．２６％）ｗａｓｔｈｅｍｏｓｔｉｎＭＮＳｓｓｙｓｔｅｍ．１ｎａｕｔｏｌｏｇｏｕｓａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ａｎｔｉ—ＩｇＧｗａｓｔｈｅｍｏｓｔ（５３．８４％），ｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙａｎｔ卜ＩｇＧ＋ａｎｔｉ－Ｃ３ｄ（３０．７７％）ａｒｄｃｏｌｄａｕｔｏａｎｔｍｏｄｙ（１５．３８％）．Ｎｏｈｅｍｏ—ｌｙｔｉｃｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｒｅａｃｔｉｏｎｏｃｃｕｒｒｅｄｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｉｓｏａｎｔｉｂｏｄｙａｆｔｅｒｉｎｆｕｓｉｏｎｏｆｂｌｏｏｄｗｉｔｈｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄ—ｉｎｇａｎｔｉｇｅｎｎｅｇａｔｉｖｅ．ＴｈｅｓｙｍｐｔｏｍｏｆａｎａｅｍｉａｗａｓａｌｌｅＶｉａｔｅｄｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｙａｆｔｅｒｑｕａｎ—ｔｉｔａｔｉｖｅｗａｓｈｅｄｒｅｄｃｅｎｓｉｎｆｕｓｉｏｎ．ＣｏｎｃＩｕｓｉｏｎ｛；ｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｉｒｒｅｇｕｌａｒａｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｎｄｉｎｆｕｓｉｏｎｏｆｓｕｉｔａｂｌｅｂｌｏｏｄｓａｆｅｔｙ．ａｒｅｃｏｎｄｕｃｔｉｖｅｔｏｄｅｃｒｅａｓｅｏｒａｖｏｉｄａｎｃｅｏｆｈｅｍｏｌｙｔｉｃｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ａｎｄｇｕａｒａｎｔｅｅｏｆｂＩｏｏｄ【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｓｅｒｕｍ｝Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ；Ｈｅｍｏｌｙｓｉｓ；Ｂｌｏｏｄｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ不规则抗体的筛查已广泛应用于输血反应的诊断与预防，特别是对有妊娠史和输血史的患者。虽然不规则抗体在正常人群中检出率仅为ｏ．３％～２．ｏ％，但它是引起迟发性免疫反应的主要原因，输血前进行常规抗体筛选，以发现有临床意义的不规则抗体，对临床输血安全具有重要的意义。本组对２００６年６月到２００７年１２月间Ｉ临床送检到我站的疑难配血标本作者单位：５２３９３０广东省东莞市中心血站（邹文涛、何子毅、刘仁强、刘景春）；４６６０００河南省周几市中心血站（李俊杰）进行不规则抗体筛查和抗体鉴定，现将鉴定结果报道如下。资料与方法１．资料检测标本均为对２００６年６月到２００７年１２月间东莞市各医疗单位送检的交叉配血疑难的患者血标本。微柱凝胶卡由Ｄｉａｎａ公司提供；筛选细胞、谱细胞、红细胞血型定型免疫试剂由上海血液生物医药制品有限公司提供；单克隆血型抗体试剂均为国外原装进口；红细胞ＡＢｏ反定型试剂由本室自制。２．仪器血清学专用离心机（ＫＡ一２２００）、普通离心机８０一２（上海手术器械厂）、ＨＺ§Ｍ水浴振荡仪（哈尔滨东联电子技术有限公司）、水浴恒温箱（上海医用恒温设备厂）、０ＬＭＰＵＳ显微镜（日本）及Ｄｉａｎａ微柱凝胶专用设备。３．微柱凝集法向标识Ｉ、Ⅱ、Ⅲ的３个微柱反应池中加２５弘Ｉ。备检血清，再加５０肛Ｌ５％相应筛检红细胞；置３７℃孵育ｌＯｍｉｎ；取出置专用离心机离心１５ｍｉｎ，观察结果。红细胞全部沉于微柱底部者为阴性，聚于微柱上面者为阳性（将阳性血清再用间接抗球蛋白试验确证）。如抗体筛选阳性需进一步进行抗体鉴定，操作方法同上。自身抗体阳性的标本采用微柱凝胶自身抗体分型卡进行抗体分型，操作方法同上。４．抗球蛋白试验（试管法）取５支标识Ｉ、Ⅱ、Ⅲ、阳性对照、阴性对照的试管，Ｉ、Ⅱ、Ⅲ管加５％相应筛检红细胞ｌ滴和被检血清２滴，阳性对照管加５％Ｒｈ（Ｄ）阳性红细胞１滴和ＩｇＧ抗一Ｄ血清２滴，阴性对照管加５％Ｒｈ（Ｄ）阳性红细胞１滴和ＡＢ型血清２滴；各管３７℃孵育１ｈ后用生理盐水洗涤３次，再加抗球蛋白试剂２滴，２０００ｒ／ｍｉｎ离心１ｍｉｎ，观察结果。当阳性对照管和被检管出现凝集，而阴性对照万方数据管不凝集时，即为阳性，说明血清中有不规则抗体存在。需进一步进行抗体鉴定，操作方法与上相同。结果不规则抗体检测结果见表１。表１不规则抗体鉴定结果不规则抗体血型系统抗体名称抗体类型例数阳性卒（％）从表１中可见，不规则抗体阳性５４例，其中同种抗体２６例（１．８５％），自身抗体２６例（８．１５％），同种抗体中以Ｒｈ血型系统最为常见，伴混合抗体的比率为３０％（３／１０）；抗体类型多为ＩｇＧ型抗体，与１９Ｍ型的比率为１２：７。自身抗体中冷自身抗体４例，抗体类型为ＩｇＭ型；温自身抗体１０例，单纯抗ＩｇＧ抗体阳性２例，抗ＩｇＧ、Ｃ３ｄ抗体同时阳性８例，抗体类型均为ＩｇＧ型。对有同种抗体的患者输入无相应抗原的红细胞后。患者未发生溶血性输血反应。有自身抗体的患者按自身免疫性溶血性贫血的输血原则输注洗涤红细胞，首次不超过１单位，采用少量多次缓慢输入后，患者贫血症状缓解。讨论根据２０００年６月卫生部颁布的《临床输血技术规范》要求对输血史或妊娠史的患者进行不规则抗体筛选，该项阳性的患者一旦输入具有相应抗原的红细胞，抗原、抗体就会发生免疫性结合，在补体的参与下，输入的红细胞发生溶解，即发生急性溶血性输血反应或者发生迟发性溶血性输血反应。急性溶血性输血反应患者出现发热、贫血、黄疽和血红蛋白尿，严重时甚至危及其生命。因此，在输血中要警惕这种输血反应发生的可能性。当不规则抗体筛选阳性时，必须进一步作抗体鉴定，确定其特异性后，再输入无相应抗原的红细胞或交叉配血相合的红细胞，才能达到安全输血的目的。因此，进行不规则抗体筛查非常重要。不规则抗体笼统地讲是指抗一Ａ、抗一Ｂ以外的血型抗体，主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生，常分为自身抗体和同种抗体，同种抗体一般具有特异性，自身抗体是非特异性的；抗体类型多为ＩｇＧ型，这种类型的抗体在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞，必须通过特殊介质（酶、抗人球蛋白、ｐｏ—ｌｙｂｒｅｎｅ等）才能使致敏红细胞出现凝集反应。近年来发展起来的微柱凝胶技术是在经典的抗球蛋白试验基础上发展起来的新型检测方法，在国外输血界已成为常规检测方法［１矗ｊ，本组在输血前应用凝胶柱技术对患者标本进行不规则抗体筛查，可以准确地检出患者体内的不规则抗体，该方法简便，易于操作、观察和标准化。从结果可见，产生同种抗体的主要是Ｒｈ血型系统，而临床上发生迟发性溶血反应的也绝大部分是由Ｒｈ血型抗体引起的，其中以抗一Ｅ最多，有些文献报道产生抗一Ｄ抗体的几率大于抗一Ｅ抗体¨］，本研究的结果与此不一致。中国台湾的调查资料认为抗一Ｄ抗体在台湾人中较为罕见，近１６０万献血者中有５４３３例ＲｈＤ阴性（１／７７６），但其中只有７例献血者有抗一Ｄ（１／２３５０００）［４］，马凯医院在１９８２年至１９９３年・１００２・国际检验医学杂志２０垡生！！旦第２９卷第１１期ｈｎＪＩ五ｂＭ。ｄ，Ｎ０’恤】ｂｅｒ２００８，ｖ０１．２９，№１１间的８７０４０例新生儿调查仅发现１例由抗一Ｄ引发的处于低温麻醉状态下手术时应注意，因为此类抗体可激活补体。当机体的体温在冷抗体最适反应温度范围内（４～２０℃）时，可发生溶血反应。输血时也要注新生儿溶血病，并需接受换血治疗［４］。虽然Ｒｈ血型中Ｄ抗原的抗原性强于Ｅ抗原的抗原性，但是东亚黄种人Ｒｈ阴性频率仅０．３％。因此，本组认为抗一Ｄ产生频率远远小于抗一Ｅ。由于Ｒｈ血型系统抗原性较强，产生免疫性抗体的频率较高，据报道每输一个单位血使受血者致敏的风险为１％～１．６％，多次输血产生同种抗体的几率为１５％～２０％，对于连续输血患者，有学者主张３ｄ筛检１次ｆ５］，有主张５～６ｄ筛检１次，以防止开始效价很低不易检出，但经过输血刺激，回忆性抗体效价迅速升高而引起溶血反应。对于同种抗体的输血治疗，原则上是根据抗体性质提前寻找相合的血液或采用其他方式输血。在筛出不规则抗体后及时与血站联系，以提前准备相合血液，或采取自身输血，为患者提前储血，使手术顺利进行。对于红细胞和（或）血清中含有自身抗体的自身溶血患者，或血清中含有冷凝集素患者，抗筛也可以出现假阳性结果，但患者自身红细胞也有凝集，应该进行自身抗体分型卡进行抗体类型分类，根据本组的经验，分类不同采取的交叉配血方法和吸收放散实验方法也不同，患者血浆经过吸收，红细胞经过放散的意加温输注。因此，对于需要输血的患者进行抗体筛选，可以及早发现不规则抗体，从而提前准备相合的血液，以保证体内有不规则抗体的患者及时用血，避免由于血型不合而引起的输血反应。参考Ｃ１］文献ｔｈｅ耆ｄＣａｔｅＪｃ４ｔｈ，ＲｅｉｌｌｙＮ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎａｎｄｉｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｔｅｓｔｆｏｒｉｎｄｉｒｅｃｔａｎｔｉｇｌｏｂｕｌｉｎｔｅｓｔｉｎｇｉｎａｃｏｍｍｕｎｉｔｙｈｏｓｐｉｔａｌｌａｂｏ—ｎｔｏｒｙ［Ｊ］．Ａ走ｈＰａｔｈｏｌＬａｂＭｅｄ，１９９９，１２３（８）：６９３—６９７．［２］ＬａｎｇｓｔｏｎＭＭ，ＰｒｏｃｔｅｒＪＬ，ｃｉｐｏｌｏｎｅＫＭ，ｅｔａ１．ＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｇｅｌｓｙｓｔｅｍｆｏｒＡⅨ）ｇｒｏｕｐｉｎｇａｎｄＤｔｙｐｉｎｇ［Ｊ］．Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ，１９９９，３９（３）：３００一３０５．［３］张丽，矫淑珍。刘杰．等．抗一Ｄ、抗一ｃ、抗一Ｅ引起溶血性输血反应１例［Ｊ］．中国输血杂志，１９９９。１２（３）：１８３．［４］林玛利．刘瑛．许先国．输血新技术一台湾经验表明：东南哑人群输血前无必要进行ＲｈＤ血型定型［Ｊ］．国际输血及血液学杂志，２００６。２９（３）：２７３—２７４．［５］李勇．杨贵贞，主编．人类红细胞血型学实用理论与实验技术［Ｍ］．北京：中国科学技术出版社，１９９９：１３９—１５７．红细胞进行交叉配血，相配合后才可用于输注。ＩｇＭ万方数据型抗体一般称为冷反应性抗体或冷凝集素，很少在３７℃有活性，一般在体内不能引起溶血反应，但患者（上矮第９９９页）（收稿日期：２００７－１２・１４）以及特异度欠佳，应多种标志物联合检测，分析多种原因，对症治疗，进行随诊监测，方可作出准确的诊断。参考文献差异有统计学意义，且其ＣＹＦＲＡ２１一ｌ值有７２％的患者在３．３～２．Ｏ弘ｇ／ｌ。范围以内，所以提高ＣＹＦＲＡ２１一ｌ参考值上限也不失为提高其特异性的良方。５．通过查阅病例资料发现对于并发症组患者，医生通常选用对症治疗药物，如阿斯美、肾上腺素等支气管舒张及解痉药；菲得欣等祛痰药；拜复乐、凯斯等抗炎药及欣康等降压药。同时也对症用了速尿以降低循环血量，降低心脏前负荷，以减少并发症对肺部损伤的加重，从而降低了ＣＹＦＲＡ２１—１水平，使疾病的良性诊断有了更确凿的依据。６．病例收集中有５例患者胸水ＣＹＦＲＡ２１—１异常升高者，由于目前ＣＹＦＡＲ２卜１在胸水中的参考值尚未见报道，所以未作定论，且由于查出结核（ＴＢ）抗体，转至专科医院治疗未作追踪。据文献报道［５］，遇到ＣＹＦＲＡ２ｌ一１升高且高度怀疑结核性时建议查胸水腺苷脱氨酶（ＡＤＡ），若ＡＤＡ升高为ＴＢ性胸水。综上所述，ＣＹＦＡＲ２１－１作为一种上皮来源的蛋白片段，单一检测由于没有组织器官特异性、灵敏度［１］马兰．艾棒萍，许佩珉。等．ｃＹＦＲＡ２１・１等肿瘤标记物在肺癌诊断巾的应用［Ｊ］－中华肿瘤杂志，１９９７，１９（４）：３１７—３１８．［２］ＤｏｈｍｏｔｏＫ，Ｈ０ｊｏＳ．ＦｕｊｉｔａＪ，ｅｔａ１．ＭｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｔｈｅｒｅｌｅａｓｅｏｆＣＹＦＲＡ２卜１ｉｎｈｕｍａｎｌｕｎｇｃａｎｃｅｒｃｅｌｌＩｉｎｅｓ［Ｊ］．Ｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ，２０００，３０（１）：５５—６３．［３］ｓｈｅａｒｄＭＡ，Ｖ０ｊｔｅｓｅｋＢ．ｓｉｍｉｃｋｏｖａＭ，ｅｔａ１．Ｒｅｌｅａｓｅｏｆｃｙｔｏｋｅｒ—ａｔｉｎ一１８ａｎｄ一１９ｆｒａｇｍｅｎｔｓ（ＴＰＳａｎｄＣＹＦＲＡ２ｌ一１）ｉｎｔｏｓｐａｃｅｔｈｅｅｘｔｒａ—ｃｅｌｌｕｌａｒｄｕｒｉｎｇａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．ＪｃｅｌｌＢｉｏｃｈｅｍ．２００２。８５（４）：６７０一６７７．［４］李睿，李蓉。乇哑文．血清细胞角蛋白１９片段检测对肺癌的临床意义［Ｊ］．中华结核和呼吸杂志，１９９８，２１（１）：２６—２９．［５］叶任高，陆再英，主编．内科学［Ｍ］．第６版．北京；人民卫生出版社，ｚ００５ｌ１０７．（收稿日期：２００７—１１一０６）